期刊简介
本刊办刊宗旨：本刊的方针及任务是贯彻临床与基础相结合、普及与提高相结合的原则，交流有关疼痛研究的新进展、新理论及新的预防治疗方法，以便促进我国疼痛医学的发展，提高人民健康水平。同时也可使国际疼痛医学界通过每篇论文的英文摘要及时了解中国疼痛医学方面的最新进展，促进国际交流。读者对象为国内临床各科医务工作者和研究疼痛原理的科研、教学工作者。
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首页>中国疼痛医学杂志
- 杂志名称：中国疼痛医学杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：北京大学；中华医学会疼痛学分会
- 国际刊号：1006-9852
- 国内刊号：11-3741/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：国家图书馆馆藏, 维普收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 万方收录(中), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美)
人前脑啡肽原基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株的构建
安珂；田玉科；杨辉；高峰；王鹏
关键词：人前脑啡肽原, 星形胶质细胞, 永生化, 细胞株
摘要：目的:构建人前脑啡肽原(hPPE)基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株.方法:采用DNA重组技术将质粒pCMVhPPE.SEQ中的人前脑啡肽原基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,经酶切鉴定和测序分析后,采用脂质体介导法将重组质粒pcDNA3.1(+)-hPPE和空质粒pcD-NA3.1(+)分别转染永生化大鼠星形胶质细胞株(IAST).经G418(600μg/ml)筛选,挑选阳性克隆并扩大培养.采用免疫细胞化学法、RT-PCR和放射免疫法检测转染细胞亮氨酸脑啡肽(L-EK)的表达及分泌,同时检测Neo基因的存在以证实转染成功.结果:重组质粒经酶切后分别出现5.4kb和950bb片段,测序分析与文献报道结果一致,表明重组质粒pcDNA3.1(+)-hPPE亚克隆成功.Neo基因检测显示重组质粒和空质粒已成功转染至IAST中,筛选获得IAST/hPPE和IAST/Neo两个细胞株,L-EK免疫染色均阳性,但平均光密度结果显示IAST/hPPE的L-EK表达明显强于IAST/Neo和IAST(P＜0.01).IAST/hPPE细胞与IAST/Neo和IAST细胞相比,hPPE mRNA表达水平和培养上清液中L-EK的分泌量明显增高(P＜0.01),而IAST与IAST/Neo细胞相比无显著性差异(P＞0.05).结论:成功构建了人前脑啡肽原基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株(IAST/hPPE),为该细胞移植用于镇痛的研究奠定了基础.
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